杀菌剂生物测定方法：附着法介绍

　　杀菌剂生物测定方法之一。是将病菌孢子附着于灭菌的种子、滤纸片、果皮或其他保护材料上，使其接触药剂，在一定条件下培养一定时间后观察有无菌丝生长，以比较药剂效果。此法常用于杀真菌剂的生物测定。其测定方法主要有两种：

　　滤纸片附着法

　　将真菌孢子附着于灭菌的滤纸片上，使其接触一系列不同浓度的药液，在适当温度、水分和养分条件下培养一定时间后，观察有无菌丝生长。一般是将直径6毫米的小滤纸片进行干热灭菌（130℃，1小时）后，在其上滴加1～2滴孢子悬浮液，再将其在药液中浸泡数分钟，用消毒镊子夹取并振落多余药液，轻轻放于培养基平面上，适温下培养2～3日观察有无菌丝生长。也可将1毫升药液与10毫升培养基混合注入灭菌的培养皿内，凝固后放上含菌的滤纸片，适温下培养2～3日，观察有无菌丝生长，比较各处理间的毒力大小。

　　种子附着法

　　将病菌孢子附着在灭菌的种子表面，再把带菌种子在一系列浓度药液中浸泡一定时间后取出，放在凝固后的培养基平面上，培养后观察病菌生长情况。具体步骤是：①选出饱满的种子，除去种皮，放入干燥的三角瓶内进行灭菌：②将病菌孢子液与灭菌的种子充分混合，除去多余水分，在定温下培养1～4天，然后在无菌条件下进行干燥；③将带菌种子放入一定浓度的药液中，随后捞出放在清洁的滤纸上，以除去多余水分；再用灭菌镊子夹取药剂处理后的种子，置于培养皿内水洋菜培养基平面上，并将种子一半埋在培养基中。一般每皿放置5粒。在定温下培养7天左右；④观察记载产生菌丝的种子数和菌丝发育情况；比较各处理间的药剂效果。