1、植物的生长期
除草剂发挥效用的范围与某地主要杂草相适应，才能真正抑制杂草，收到除草的预期效果。杂草在生长初期容易被杀死，杂草越老，除草剂的效果越不明显。例如，除草剂氟乐灵，600 平方米的土地面积使用量在80 毫升左右，在杂草两个叶时除草效果显著，当杂草长到三个叶时具有一定的抑制作用，当杂草长至四个叶时，药效几乎没有，除草效果为零。
2、自然环境因素
首先，光照是除草剂发挥效用的关键因素，例如，含有二苯醚类的除草剂，只有在光照下才能发挥药效，当处于黑暗中，药效全无。光照越强烈，药效发挥的越明显。
其次，风和雨。除草剂是喷涂时间最好选在晴天，并且没有风，遇到大风天气，会使除草剂被风吹走，影响药效。除草剂喷涂之后遇到下雨天气，会使植物表层的药液被冲刷掉，同样会影响药效的发挥。
最后，温度。在高温状态下，杂草会因为光合作用吸收大量药液，使药效成倍增长，否则会限制药效的发挥，例如，喷涂除草剂时的温度应该选在20 至30 度之间。
3、土质状况
土壤的条件是除草剂发挥效用的影响因素之一，尤其是土壤的酸碱度，例如，碱性土壤对除草剂敏感，容易发挥药效。土壤的干湿度也是影响药效的要素之一，当土壤湿润，杂草生长快，但其角质层壁较薄，适合使用除草剂，并且药效显著。另外，土壤的构成也会影响药效。土壤中所含有的有机质少，利于除草剂渗入，会增加药效。
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