①按照灭菌器要求的注水量,加水到指定的标度,最好加入沸 水,一方面可缩短升温时间,同时避免长期使用冷水锅内结水碱。 ②将需要灭菌的培养基或器物放在灭菌器内。 装入的试管、 菌种瓶等物不宜过挤,以利热蒸汽流通,特别是袋装培养基不能叠 第五章 天麻栽培技术放紧压,妨碍蒸汽渗透,造成灭菌不彻底。 需灭菌的器物装好后, 将灭菌器的盖密封,不能漏气,然后打开放气阀门。 ③接通电源或打开锅炉的进气阀门加热。 ④排除干净锅内的冷空气,否则影响灭菌的效果。 排放冷空 气的方法有两种,一种是当水加热沸腾后空气由已打开的放气阀 门排出,等蒸汽从气门有力地冲出后,说明空气已排完,可关闭气 门继续加热;另一种方法是加热后不开气门,当气压表的指针上升 到 0? 5 千克 / 厘米2 时,打开放气阀门,排出冷空气,指针降至“0” 后,再关上放气阀继续加热。 ⑤当压力上升到所需要的指标后,开始计算灭菌时间,灭菌过 程中保持压力稳定,不能忽高忽低。 特别应该注意安全阀门,如果 安全阀失灵,当压力超过灭菌最大的承受能力,会出现意外事故。 ⑥达到灭菌要求的时间后,关掉热源停止加热,排出蒸汽使压 力慢慢下降。 排气的速度应适当。 若排得太快,增大瓶内外的压 力差,灭菌器中试管或三角瓶中的培养基会突然沸腾,冲脱瓶塞或 沾污棉花塞;排得太慢,等于延长了灭菌时间,对一些培养基是不 利的。 琼脂试管培养基和液体培养基,灭菌后去掉热源,让其自然 排气,当压力表指针降至“0”时方可打开锅,一般来说,从排气到 打开灭菌锅的时间为 8 ~ 12 分钟。 塑料袋培养料灭菌时,应让其 自然冷却,当压力下降到 0? 5 千克 / 厘米2 时,打开排气阀门放气, 以免在减压过程中,袋内外产生压力差,击穿塑料袋导致污染 杂菌。 ⑦防止弄湿棉塞。 灭菌前应将试管的棉花塞用油纸或塑料薄 膜包好,灭菌时瓶子的棉塞不能接触灭菌锅壁,瓶子上面应盖铝帽 或防水油纸,以免锅盖内面的水流到棉塞上。 若棉塞潮湿,可在锅 中烘烤一定时间再出锅。