蜜环菌菌种的定期移植保藏法是最早使用且至今仍普遍采用 的方法,也称传代培养保藏法。 该方法简便易行,不需要特殊设 备,并能随时观察所保藏菌种的情况。 其是将在培养基上生长好 的蜜环菌菌种置于低温处保存,使其停止或缓慢生长。 一定时间 后,将其重新移植到新的培养基上,待生长良好后,再放到低温下 保藏。 如此一代代地继续下去,故也称传代培养。 低温保藏法:将要保藏的蜜环菌菌种接种在适宜的培养基上, 放置到最适温度下培养,当菌索健壮地长满培养基,将试管菌种取 出,用硫酸纸或牛皮纸将棉塞包好,移入 4 ~ 6℃ 的低温冰箱中保 藏,隔一定时间再重新移接培养 1 次。 为了使保存时间延长,减少 培养基失水,用石蜡封试管口(需将棉塞剪平),或用灭菌木塞封 口,还可以选用灭菌胶塞或塑料塞代替棉塞。 具体做法是:选择干 净合适的橡皮塞,放到 75%酒精溶液中消毒,然后吸去酒精。 在 无菌条件下,拔去试管上的棉塞,换上胶塞,再用石蜡密封,放入 4℃冰箱中保存。 用于低温保藏的培养基,一般采用马铃薯?
葡萄糖琼脂培养 基。 在配制保藏用培养基时,还需加入少许缓冲剂,如 0? 2%磷酸 氢二钾、
磷酸二氢钾或 0? 02%碳酸钙等,以中和菌种在保藏过程 中产生的酸。