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茶树菇的菌种制作

2023-7-26 14:00| 发布者: 李先生| 查看: 0| 评论: 0

  不管种什么菇,都要有种源。我们可以自己动手,从品质优、长势好的新鲜菇上取得它的组织,用这组织作种源,进行培养、扩繁。经过三个阶段就可以进入出菇生产了。母种制作:


  1 母种制作


  第一个阶段是制作母种。


  1.1 母种培养基的制作


  母种培养基的原料有:马铃薯、葡萄糖、琼脂、水。


  下面我们以配置1000毫升母种培养基为例,将马铃薯切片后,称重200克,葡萄糖20克、琼脂20克。琼脂要泡在水中备用。把量筒里的水倒入锅中,加入马铃薯片煮沸,煮至用筷子轻轻一碰,马铃薯片就碎了,这样就可以用纱网过滤煮好的马铃薯液,然后倒在量筒里,看一下,如果不足1000毫升,就加水补足1000毫升,再倒入锅中煮沸,捞出琼脂加入锅中,然后加入葡萄糖,煮至葡萄糖和琼脂完全融化,母种培养基就配置好了。


  分装母种培养基时,用注射器抽取热的母种培养基,每次15毫升,注入到18毫米×200毫米试管中。要注意:母种培养基的温度降到45℃以下时会凝固,所以分装过程要在母种培养基凝固前完成。分装完后,及时用棉塞将试管口塞住。


  把每七根试管用皮筋扎成一捆,用报纸包裹试管口,再用皮筋将报纸扎紧。将试管放入高压灭菌锅内高压灭菌,盖上锅盖,拧紧压紧螺帽,在压力为0.135Mpa(兆帕)的条件下,持续灭菌40分钟。灭菌完后,要打开放气阀释放灭菌锅内的压力,直到压力表的指针归零,确认没有压力后,才能打开灭菌锅,用湿布包裹试管取出。


  将灭菌后的试管放置在托盘内,试管口要搁在托盘的边沿上,让试管内的母种培养基自然地形成斜面,扩大菌种面积,斜面的长度约为试管长度的2/3。


  对于无菌箱的灭菌,一般是采用点燃气雾消毒剂的办法。在无菌箱内点燃夹在报纸中的气雾消毒剂,气雾消毒剂燃烧时会冒出白烟。给无菌箱灭菌30分钟后,待白烟消散完后,灭菌就完成了。


  1.2 接种


  制作母种时,先用酒精棉球擦手,点燃酒精灯,用酒精棉球擦拭长柄钩针,再用酒精棉球擦拭树菇表面,然后把小刀放在酒精灯火焰消毒二三秒钟,用消毒过的小刀割开品质优长势好的新鲜茶树菇的菌柄,用手将茶树菇撕成两半,在菌柄与菌盖连接处,用小刀切割一小块茶树菇组织,打开母种培养基试管棉塞,为了避免杂菌感染,要将试管口靠近酒精灯火焰,用长柄钩针钩取切割好的茶树菇组织,带到试管中,放在试管培养基斜面的中部,退出长柄钩针,将棉塞在火焰上消毒,然后塞住试管口。这样母种制作的第一步就可以了。


  第二步是将带有茶树菇组织的试管放入培养箱中,将培养箱的温度设定在25℃,经过14天的培养,待菌丝长满培养基的斜面,我们就培养出了茶树菇的母种。


  2 原种制作


  有了母种,我们下一阶段的任务是将母种扩繁到原种,为规模化生产提供种源作准备。这歩可采取固体培养基和液体培养基两种方式进行,下面分别进行介绍。


  2.1 在固体培养基里制作原种


  首先,我们介绍在固体培养基里制作原种的方法。


  固体原种培养基的原料为:棉籽壳84%,麸皮15%,石膏1%。配置培养基前棉籽壳要先进行预湿。在50千克的干的棉籽壳中加水55-60千克,搅拌均匀,让棉籽壳充分吸收水分,用手握紧棉籽壳,有水从手指缝中流出,即含水量为60%。


  配置时先将石膏与麸皮混合搅拌,然后再与棉籽壳混合搅拌均匀。


  分装时选用规格为13厘米×27厘米,厚度为0.04厘米的聚乙烯袋,将搅拌好的培养基料,装入聚乙烯袋,然后套上颈圈,盖上瓶盖。


  把分装好的固体原种袋放入高压灭菌锅灭菌,在压力为0.15MPa的条件下,持续灭菌2-2.5小时。注意:经灭菌后的原种袋要在室温下自然冷却,待料温降至28℃以下,然后才能进行接种,否则由于料温过高,会烧死菌种,产生不萌发菌丝的现象。


  在原种接种前,应先将原种栽培袋放置于无菌箱的一侧,母种试管放在靠近身边的位置。然后用气雾消毒剂先给无菌箱灭菌。


  灭菌后,取出酒精棉球擦手、擦拭母种试管外壁、长柄钩针,点燃酒精灯,将母种试管在酒精灯火焰上消毒,取下母种试管棉塞,为了避免杂菌感染,将试管口靠近酒精灯火焰,将原种袋放置于左手的内侧,打开瓶盖,将长柄钩针在酒精灯火焰上消毒后,伸入试管,用钩针分离菌丝,钩取菌丝放入原种袋中,盖好原种瓶盖,将原种袋放置于另一侧。原种接种工作就完成了。


  固体原种接种完后,将原种袋放置于培养架上,在黑暗的环境下培养,培养室内温度应控制在18℃-28℃,湿度控制在70%左右,经过35天的培养,菌丝就会长满菌袋。我们就用固体培养基培养原种的方法,得到了茶树菇的原种。


  2.2在液体培养基中制作原种


  下面我们介绍,在液体培养基中制作茶树菇原种的过程。


  以配置3000毫升液体原种培养基为例,将马铃薯切片后,称重600克、取葡萄糖60克、磷酸二氢钾3.6克、硫酸镁2.4克、蛋白胨2.4克、维生素B12片(10毫克/片)夹在纸中间碾成粉末备用。


  按照配置母种培养基时的方法用纱网过滤煮好的马铃薯液,倒入盆中,如不足3000毫升加水补足3000毫升,然后依次加入维生素B1粉末,葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨,搅拌均匀,这样原种液体培养基就配置好了。


  在容量为2000毫升的玻璃园瓶中倒入1500毫升液体培养基,接着在瓶内放入以后磁力搅拌时要用的磁棒,然后塞上棉塞,用报纸包裹瓶口,用皮筋扎紧。


  将装好液体培养基的园瓶放入高温灭菌锅中灭菌,在压力为0.15MPa(兆帕)的条件下,持续灭菌2-2.5小时,将灭菌后的液体培养基自然冷却至室温,再进行接种。


  液体原种接种前,用气雾消毒剂给无菌箱灭菌。


  灭菌后,用酒精棉球擦拭双手,擦拭长柄钩针,点燃酒精灯,将经过灭菌后园瓶,斜着放在碗里。为了避免杂菌感染,要将瓶口靠近酒精灯火焰,摘下园瓶瓶口上的棉塞,取下母种试管棉塞,将长柄钩针在酒精灯火焰上消毒后,伸入试管中,分离菌丝,用钩针勾出菌块,将菌块放在园瓶培养液表面,每个园瓶放置约4-6个菌块。然后把园瓶棉塞在酒精灯火焰上消毒,塞住园瓶瓶口,这样就把母种接到液体培养基上去了。


  将装有母种菌块的园瓶放置在培养室的培养架上,培养室温度控制在22℃-25℃,静置48-72小时,然后开启培养架夹层里的电机旋钮,放置在园瓶里面的磁棒,在磁力搅拌器的带动下,使园瓶内的液体原种培养液转动起来。经过3天的培养和搅拌,菌丝在培养液中形成团状,这就是用液体培养基培养的方法,培养出的茶树菇的原种。


  3 栽培种制作


  有了茶树菇的原种还不够,我们在第三阶段还要把它扩大到栽培种,而栽培种需要在栽培袋里的培养基上培育出来。下面我们先介绍栽培袋培养基的制作过程。


  3.1 栽培袋培养基的制作


  栽培袋培养基的原料比例为:棉籽壳83.6%,麸皮15%,石膏1%,促酵剂0.4%。其中棉籽壳起主要营养作用;麸皮用来调节培养料的碳氮比,可促进培养料中其它成分的利用,对提高产量有重要作用;石膏可直接补足茶树菇生长的硫、钙等营养元素。


  培养基配置前,棉籽壳要提前一天加水预湿。在50千克的干的棉籽壳中,加水55-60千克,配置时要注意,混合原料前促酵剂不能沾水,由于促酵剂遇水会结块,不利于促酵剂与其它原料均匀的混合,所以应先将促酵剂与石膏混合,再与麸皮混合搅拌,最后与预湿的棉籽壳混合搅拌均匀。


  将搅拌均匀的培养基料用灌装机分装入聚乙烯袋,用绳子将袋口扎紧。均匀的码放在铁筐里,准备灭菌。


  这里介绍一个投入少、效果好的土法灭菌锅。灭菌锅长4.5米,宽3米,高1米。下半部分用红土砖,垒制50厘米高的土灶,土灶正面有两个炉火口,在炉火口下面各设一个出灰口,土灶两侧各有一个鼓风口,用于加热时向炉内鼓风,在土灶的后面,用红土砖垒制高度为3米左右的烟囱。土灶上半部分为钢板制作的高50厘米的水槽,水槽两侧内壁及水槽中间焊有角钢,角钢上方铺木板,以堆放栽培袋。水槽左侧有一根竖的加水口,既便于了解水槽内水面高度,又可用于向水槽内加水。水槽的四边有宽约20cm的边沿,每隔90cm左右有焊在水槽边沿和靠水槽底部上的钢管支撑、加固,钢管上套着用粗铁丝焊成的铁环。


  将装有栽培种培养基袋的铁筐整齐的码放到水槽木板上。码放好后,先盖上塑料布,然后再加盖棚布,用绳子将棚布和塑料布扎紧,将塑料布和棚布的多余部分沿四边水槽在边上折齐、叠好,四周用木板压住,提起套在钢管上的铁环,用长约80cm的钢管穿过,一端压在木板上,另一端用木棍支撑在下面,利用杠杆的原理,可以把压在塑料布和棚布上的木板压紧。这样做的好处是,减少被包裹在里面的大量栽培种培养基袋,在升温时的漏汽,有利于更快升温和保温,节约燃料。


  现在就可以点燃炉火升温灭菌了。


  在栽培袋培养基中加入0.4%促酵剂,这是一项新的专利技术,其主要成分以硝酸铵为主要原料合成的新的生物抗菌剂。它只需将栽培袋培养基加热到85℃,促酵剂就迅速地挥发于栽培袋培养基,保持料温85℃,5-7小时,促酵剂很快地发酵,短时间内加速了栽培袋培养基中杂菌、有害微生物的死亡,从而达到彻底灭菌的效果。同时由于栽培袋培养基未经过高温,不但节约了能源,而且营养损失很小,接种后菌丝吃料快,发菌快,生长健壮,畸形菇少,品质优良,产量高。病虫害也减少了。


  灭菌完成后,栽培袋培养基自然冷却至室温,就是茶树菇的栽培袋。


  原种存在于固体和液体两种培养基中,栽培种的制作也就分为,将固体原种接种到栽培袋基质中和将液体原种接种到栽培袋基质中两种方法。


  3.2 将固体原种接种到栽培袋基质中


  下面我们先介绍将固体原种接种到栽培袋基质中的过程。


  给无菌箱灭菌前,先把栽培袋放置在无菌箱的一侧,长满菌丝的原种袋放在中间。放下无菌箱的盖子。


  现在介绍一种新的灭菌方法,就是使用臭氧气雾消毒器灭菌。根据接种场地的不同,在无菌箱内接种时可选用便携式臭氧气雾消毒器,将臭氧气雾消毒器放置在无菌箱上方,由于臭氧的比重重于空气,要将臭氧消毒器的出气管口放在需要消毒的无菌箱的底板上。插上电源,打开开关,按顺时针方向旋转定时器,一般旋钮至50分钟。时间设定完毕后,机器开始消毒,经过20分钟,无菌箱就可以开始接种工作了。


  接种时,用酒精棉球擦拭双手和长满菌丝的原种培养袋表面。点燃酒精灯,将镊子在酒精灯火焰上消毒后,破开原种培养袋,再次将镊子在酒精灯火焰上消毒,盖灭酒精灯,然后用镊子夹取一块长满菌丝的原种培养基,同时使另一人解开栽培袋的扎口绳,将长满菌丝的原种培养基放入栽培袋培养基上,用绳子扎紧袋口,放置于另一侧。将固体原种接种在栽培袋中的工作就完成了。


  由于固体培养基原种与栽培袋内基质的接触面积小,不利于菌丝吸取基质的养分,造成菌丝生长缓慢,产量低。接种效率也比较低。现在不少菇农采用将液体培养基上长的原种接种到栽培袋基质中的生产方法。


  3.3 将液体原种接种到栽培袋基质中


  接下来,我们介绍将液体原种接种到栽培袋基质中的过程。


  先开启移动式的臭氧消毒器的开关,按下标有“臭氧”的按钮,机器开始对接种室消毒。20分钟后,就可以进行接种工作了。


  接种时,工作人员用酒精棉球擦拭双手,擦拭液体原种瓶瓶口,摘下棉塞,将液体原种摇匀,另一人打开栽培袋的瓶盖,向栽培袋倒入约50毫升液体原种,迅速盖好瓶盖,放在筐内。液体原种接种栽培袋的好处是接种快,发菌快。杂菌生长的机会少。


  如果菇农的生产条件有限,无法制作母种,有些制作原种也有困难,可根据自己的实际情况,向正规的科研单位购买。然后自己将母种培养到原种,或由原种培养到栽培种。

  
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